操作步骤

1. 包被抗原：用包被液将抗原作适当稀释, 一般为1～10微克/孔,每孔加200微升,37℃温育1小时后,4℃冰箱放置16～18小时.

2. 洗涤：倒尽板孔中液体,加满洗涤液,静放三分钟,反复三次,最后将反应板颠倒在吸水纸上,使孔中洗涤液流尽.

3. 加封闭液200微升,37℃放置一小时.

4. 洗涤同2.

5. 加被检血清：用稀释液将被检血清作几种稀释,,每孔200微升.同时作稀释液对照.37℃放置2小时.

6. 洗涤同2.

7. 加辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小时.

8. 洗涤同2.

9. 加底物：邻苯二胺溶液加200ml,室温暗处10--15分钟.

10. 加终止液：每孔50微升.

11. 观察结果：用酶联免疫检测仪记录450nm读数.

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