ELISA试剂盒说明书|人ELISA 试剂盒检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）.往预先包被谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）抗体的包被微孔中,依次加入标本 标准品 HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤.用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色.颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）呈正相关.用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值）,计算样品活性.

样品收集 处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离.

2. 血浆：EDTA 柠檬酸盐或肝素抗凝.3000转离心30分钟取上清.

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物.

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎.3000转离心10分钟取上清.

5. 保存：如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻.

自备物品

酶标仪（450nm） 高精度加样器及枪头：0.5-10uL 2-20uL 20-200uL 200-1000uL 37℃恒温箱

操作注意事项

试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟.从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用.

实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封（低温干燥）保存.

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍,终结果乘以5才是样本实际浓度.

严格按照说明书中标明的时间 加液量及顺序进行温育操作.

所有液体组分使用前充分摇匀.

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900.

2. 灵敏度：低检测浓度小于1.0 U/ml.

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应.

4. 重复性：板内 板间变异系数均小于15%.

5. 贮藏：2-8℃,避光防潮保存.

6. 有效期：6个月

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