项目 | 描述 |
产品应用 | 科研 链霉素检测试剂盒 |
反应种属 | |
检测范围 | |
物理性能 | 试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。 |
用途 | ELISA免疫学 |
实验原理 | 具体的实验原理以及所需注意事项等详细内容,均详见产品说明书。若您在使用产品的过程中遇到了任何疑难问题,或是对产品的功能、操作方式存有疑惑,请及时咨询我们专业且热情的客服人员! |
特异性 | 详见说明书 |
重复性 | 板内变异系数均<10%,板间变异系数均<15%。 |
回收率 | 回收率在 85%-115%之间。 |
试验所需自备试验器材 | 1、标准规格酶标仪。2、自动洗板机。3、振荡器。4、系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。 |
操作程序 | 所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。3、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL,样本孔 加待测样本 50μL。4、加入酶标记物 50μL,再加入抗体工作液 50μL。5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育 30min。6、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩 去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操 作程序进行洗板,添加浸泡 30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加 底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。7、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用 封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育 15min。8、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)。 |
注意事项 | 试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。 |
问题分析 | ①问题描述:阴阳性对照结果不稳定可能原因及相应对策:1.吸液或加液不准——检查移液器及吸头2.平衡时间太短——保证充足的平衡时间3.洗涤不完全——保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量②问题描述:显色很弱或无色可能原因及相应对策:1.孵育时间太短——保证充足的孵育时间2.实验温度不正确——使用推荐的实验温度3.试剂体积不够或漏加/稀释不正确——检查吸液及加液过程,保证所有试剂按顺序足量添加 4.酶标记物失活或底物失效——混合酶结合物和底物,通过迅速显色来检查判断③问题描述:读数数值低可能原因及相应对策:1.酶标仪设置不正确——在酶标仪上检查波长及滤光片设置/提前打开酶标仪预热④问题描述:变异系数大可能原因及相应对策:1.加液不正确——检查加液情况⑤问题描述:背景值高可能原因及相应对策:1.检测抗体的工作浓度过高——使用推荐的稀释倍数2.酶标板洗涤不完全——保证每步清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞;是否使用试剂盒配备的洗涤液3.洗液有污染——配制新的洗液⑥问题描述:灵敏度低可能原因及相应对策:1.ELISA试剂盒保存不当——按说明书要求保存相关试剂2.读数前未终止——OD读数前应在每孔中加入终止液 |
声明 | 试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。 |