项目 | 描述 |
产品应用 | 科研 小鼠促黄体激素(LH)检测试剂盒 |
反应种属 | 小鼠 |
检测范围 | 1.25mU/ml—40mU/ml |
物理性能 | 各液体组分澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。 |
用途 | 用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中小鼠促黄体激素(LH)的浓度。 |
实验原理 | 本试剂盒采用竞争 ELISA 法,往预先包被促黄体激素(LH)抗体的微孔板中依次加入样本/校准品和 AsaayDiluent,经过温育洗涤,再加入 SA-HRP 温育。再次洗涤后加入底物 TMB 显色,室温显色并用终止液终止反应后读取 OD值。OD 值高低和样品中的促黄体激素(LH)呈负相关。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点,对血清中 PRL 的减少或升高有可靠的检出性能。 |
特异性 | 本试剂盒识别小鼠促黄体激素(LH),与结构类似物无交叉。 |
重复性 | 板内,板间变异系数均<10%。 |
回收率 | 回收率在 85%-115%之间。 |
试验所需自备试验器材 | 1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱4.蒸馏水或去离子水 |
操作程序 | 1. 计算并确定一次实验所需的预包被板条数,取出所需板条放置在 96 孔框架内,剩余微孔板放回铝箔袋密封,保存于 4?C。2. 试剂盒和样本在室温下(25-28?C)平衡60min,充分平衡到室温(注意: 试剂盒和样本的平衡,非常重要,一定要平衡到足够时间)。3. 设置标准品孔、样本孔和空白孔。4. 空白孔什么都不加,标准品孔各加不同浓度的标准品 15μL;5. 样本孔中加入待测样本 15μL(根据情况可适当稀释);6. 除空白孔外所有孔加入Asaay Diluent 100μl,混匀,贴上封板膜,室温(20-25℃)温育60分钟。7. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 20s,甩 去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。8. 除空白孔外,每孔加入 SA-HRP 100μL,室温(20-25℃)温育 30min;9. 重复步骤7;10. 每孔加入 TMB 100μL,室温避光反应 10-15min。然后每孔加入终止液 100μL,测定 450nm 波长处各孔的 OD值。 |
注意事项 | 试剂盒检测范围不等同于样本的浓度范围,如果您的样品中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验拉梯度,以确定稀释倍数)。 |
问题分析 | ①问题描述:阴阳性对照结果不稳定可能原因及相应对策:1.吸液或加液不准——检查移液器及吸头2.平衡时间太短——保证充足的平衡时间3.洗涤不完全——保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量②问题描述:显色很弱或无色可能原因及相应对策:1.孵育时间太短——保证充足的孵育时间2.实验温度不正确——使用推荐的实验温度3.试剂体积不够或漏加/稀释不正确——检查吸液及加液过程,保证所有试剂按顺序足量添加 4.酶标记物失活或底物失效——混合酶结合物和底物,通过迅速显色来检查判断③问题描述:读数数值低可能原因及相应对策:1.酶标仪设置不正确——在酶标仪上检查波长及滤光片设置/提前打开酶标仪预热④问题描述:变异系数大可能原因及相应对策:1.加液不正确——检查加液情况⑤问题描述:背景值高可能原因及相应对策:1.检测抗体的工作浓度过高——使用推荐的稀释倍数2.酶标板洗涤不完全——保证每步清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞;是否使用试剂盒配备的洗涤液3.洗液有污染——配制新的洗液⑥问题描述:灵敏度低可能原因及相应对策:1.ELISA试剂盒保存不当——按说明书要求保存相关试剂2.读数前未终止——OD读数前应在每孔中加入终止液 |
声明 | 试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。 |