产品仅供科研使用，不得用于临床诊断 !
| 项目 | 描述 |
| 产品应用 | 科研 人抗肝肾微粒体抗体（LKM-Ab）定量检测试剂盒 |
| 反应种属 | 人 |
| 检测范围 | 25U/mL—800U/mL |
| 物理性能 | 各液体组分澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装，无破损漏气。 |
| 用途 | 用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中人抗肝肾微粒体抗体（LKM-Ab）的浓度。 |
| 实验原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心法。用抗人抗肝肾微粒体抗体（LKM-Ab）抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人抗肝肾微粒体抗体（LKM-Ab）会与包被抗体结合，再加入辣根过氧化物酶标记的抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，反应洗板后，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。颜色的深浅和样品中的人抗肝肾微粒体抗体（LKM-Ab）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值)，计算样品浓度。 |
| 特异性 | 本试剂盒识别人抗肝肾微粒体抗体（LKM-Ab），与结构类似物无交叉。 |
| 重复性 | 板内，板间变异系数均<10%。 |
| 回收率 | 回收率在 85%-115%之间。 |
| 试验所需自备试验器材 | 1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱4.蒸馏水或去离子水 |
| 操作程序 | 1. 计算并确定一次实验所需的预包被板条数，取出所需板条放置在 96 孔 框架内，剩余微孔板放回铝箔袋密封，保存于 4?C。2. 试剂盒和样本在室温下(25-28?C)平衡60min，充分平衡到室温（注意： 试剂盒和样本的平衡，非常重要，一定要平衡到足够时间）。3. 设置标准品孔、样本孔和空白孔。4. 标准品孔各加不同浓度的标准品 50 μL；5. 样本孔中加入待测样本 50 μL（根据情况可适当稀释）；6. 空白孔加入样本稀释液 50 μL；7. 所有孔中，每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100 μL， 用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育45min。8. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置 20s，甩 去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。9. 每孔加入底物 A、B 各 50 μL，37℃避光孵育 15min。10. 每孔加入终止液 50 μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。 |
| 注意事项 | 试剂盒检测范围不等同于样本的浓度范围，如果您的样品中检测物浓度 高于标准品最高值，请根据实际情况，做适当倍数稀释(建议先做预实验拉梯度，以确定稀释倍数)。 |
| 问题分析 | ①问题描述：阴阳性对照结果不稳定可能原因及相应对策：1.吸液或加液不准——检查移液器及吸头2.平衡时间太短——保证充足的平衡时间3.洗涤不完全——保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量②问题描述：显色很弱或无色可能原因及相应对策：1.孵育时间太短——保证充足的孵育时间2.实验温度不正确——使用推荐的实验温度3.试剂体积不够或漏加/稀释不正确——检查吸液及加液过程，保证所有试剂按顺序足量添加 4.酶标记物失活或底物失效——混合酶结合物和底物，通过迅速显色来检查判断③问题描述：读数数值低可能原因及相应对策：1.酶标仪设置不正确——在酶标仪上检查波长及滤光片设置/提前打开酶标仪预热④问题描述：变异系数大可能原因及相应对策：1.加液不正确——检查加液情况⑤问题描述：背景值高可能原因及相应对策：1.检测抗体的工作浓度过高——使用推荐的稀释倍数2.酶标板洗涤不完全——保证每步清洗完全；如果用自动洗板机，请检查所有的出口是否有堵塞；是否使用试剂盒配备的洗涤液3.洗液有污染——配制新的洗液⑥问题描述：灵敏度低可能原因及相应对策：1.ELISA试剂盒保存不当——按说明书要求保存相关试剂2.读数前未终止——OD读数前应在每孔中加入终止液 |
| 声明 | 试剂盒仅供研究使用，如将其用于临床诊断或任何其他用途，我公司将不对因此产生的问题负责，亦不承担任何法律责任。 |
